Клеточная суспензия

Клеточная суспензия — это отдельные клетки или клеточные агрегаты, которые выращивают в жидкой питательной среде в условиях постоянной аэрации. Основным способом получения суспензионных культур является погружение кусочка каллуса в жидкую среду, перемешивание. Для инициации суспензионного культуры нужно 2 — 3 г каллуснои ткани на 60 — 100 мл жидкой питательной среды. Первичную суспензию получают на шейкере, имеющем скорость перемешивания 100 — 120 об / мин.

Оптимальной для получения високодисперсной суспензионного культуры является рыхлая, обводненные каллусная ткань, выращенная на среде с 2,4 — Д, без ионов Са2 +. Для выращивания клеточных суспензий используют в основном те же питательные среды, что и для каллусных культур. Но есть ряд сред, предназначенных непосредственно для выращивания суспензионных культур.

Первичную суспензию перед субкультивированием фильтруют через 1 — 2 слоя марли, нейлоновые или металлические ситечки, чтобы избавиться от больших плотных комков каллуснои ткани, остатков эксплантов или очень крупных агрегатов. Как правило, продолжительность пассажа при культивировании клеточных суспензий составляет 14 — 18 дней. Плотность популяции за этот промежуток времени достигает 106 — 5х106 клеток на мл. Рост суспензионных культур можно оценить по одному или нескольким параметрам: 1) объем осажденных клеток (ООК) 2) число клеток, 3) сырая и сухая масса; 4) содержание белка и ДНК, 5) жизнеспособность клеток.

Для глубинного культивирования растительных клеток используют открытые или закрытые системы в периодическом или проточном режимах — способы культивирования разработанные в микробиологии. Суспензийные культуры растительных тканей широко используют для получения традиционных для растений соединений вторичного синтеза: алкалоидов, терпеноидов, эфирных масел и т. д.